Agela Venusil AA HPLC法測定"皮革奶"中羥脯氨酸


Venusil AA 氨基酸分析的原理為目前廣泛使用的PITC(異硫氰酸苯酯)衍生法。經過簡化后的衍生方法有很多優點:方便、快速;衍生物單一、穩定,-20℃可貯存數月;采用Venusil AA 柱分析時間短;結果準確;試劑、副產物、溶劑等多種干擾因素可通過快速萃取去除;紫外檢測(254nm)靈敏度高。
樣品:
取某品牌牛奶0.5g,按照博納艾杰爾氨基酸分析方法包進行水解衍生,并取混合氨基酸標準溶液(準確量取氨基酸標準溶液1.0 mL,置于5mL容量瓶中,加0.1mol/L鹽酸溶液定容至刻度)加內標正亮氨酸,然后進行衍生。(異硫氰酸苯酯為衍生劑)
色譜柱:Agela Venusil AA,4.6×250mm,5µm,100Å(訂貨號:VA952505-K)
流動相:A:稱取15.2g無水醋酸鈉,加水1850mL,溶解后用冰醋酸調pH至6.5,然后加乙腈140mL,混勻,用0.45µm濾膜過濾。
B:80%(V/V)乙腈溶液
時間 |
流動相A |
0 |
0 |
2 |
0 |
15 |
10 |
25 |
30 |
33 |
45 |
33.1 |
100 |
39 |
100 |
39.1 |
0 |
45 |
0 |
流速:1.0mL/min
進樣體積:10μL
溫度:40℃
波長:254nm
Agela Venusil AA HPLC法測定牛奶中羥脯氨酸混和標準品圖譜 (6.50min為羥脯氨酸)
Agela Venusil AA HPLC法測定牛奶中羥脯氨酸圖譜(6.51min為羥脯氨酸)
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