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近期下廠，遇到了熒光分光光度計，由于該類儀器在蘇州很少有廠家使用，這讓我有了次難得的近距離實踐機會，為此我再次學習了JJG537-2006《熒光分光光度計檢定規(guī)程》以及熒光分光光度計的相關信息。

熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數(shù)的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化, 從而闡明分子結構與功能之間的關系。熒光分光光度計的激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm，發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm。可用于液體、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描。

　　熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點，可以廣泛應用于生命科學、醫(yī)學、藥學和藥理學、有機和無機化學等領域。

熒光分光光度計的工作原理：物質熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出，從而產(chǎn)生熒光。不同物質由于分子結構的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜，因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。在溶液中，當熒光物質的濃度較低時,其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關系,即F=kc,利用這種關系可以進行熒光物質的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似，熒光分析通常也采用標準曲線法進行。

以上均為我收集到的書面信息，而通過現(xiàn)場學習，我有以下幾點收獲。

一、我了解到熒光分光光度計有兩個單色器，即激發(fā)單色器系統(tǒng)及發(fā)射單色器系統(tǒng)。在規(guī)程中，根據(jù)儀器所使用的單色器種類不同，分為A類（色散型單色器）、B類（濾光片單色器），兩類儀器的技術指標也有所不同。而現(xiàn)在的熒光分光光度計大多使用的是色散型單色器，更便捷，靈敏度也更高。所以均可參照A類儀器的校準方法及技術指標。

二、在校準氙燈亮線方法時，需要把無熒光的白色濾紙條放入樣品室，但一定要注意，要佩戴一次性手套，因為手洗的再干凈，也會使濾紙沾上熒光。

三、在校準萘峰位置方法時，我發(fā)現(xiàn)規(guī)程上所要求用的10^-4萘-甲醇溶液濃度偏大，使響應值超出量程無法顯示。因為我記得日立產(chǎn)的老款儀器可以做出響應值，測得萘峰，而這次的儀器為PE的新款儀器，靈敏度要比以前老儀器提高了幾個等級。我準備下次再帶10^-7萘-甲醇溶液做確認測試。

由于熒光分光光度計在蘇州比較少見，我們室還沒有配全規(guī)程上規(guī)定的所有標準溶液，再加上自身對該儀器的認識有待提高，項目還做不全，因此僅有以上幾點拙見，我將繼續(xù)學習，努力提高自身專業(yè)技術水平，為理化室和計量所的事業(yè)添磚加瓦！